Empleo de una PCR-multiplex para diferenciar caprinos vacunados con M. bovis BCG de infectados con M. bovis de campo

Resumen

El objetivo del trabajo fue determinar la capacidad de la prueba diagnóstica de PCR-Multiplex para diferenciar animales vacunados con BCG de los infectados con Mycobacterium bovis patógena. Se trabajó con muestras de moco nasal, sangre y órganos obtenidos en la necropsia de caprinos desafiados con M. bovis patógena (Grupo 1 n=10), vacunados con M. bovis-BCG y desafiados con M. bovis patógena (Grupo 2 n=10), y solamente vacunados con M. bovis-BCG (Grupo 3 n=4). Todas las muestras se analizaron con los métodos de PCR-Multiplex y cultivo bacteriológico. El cultivo bacteriológico de la sangre y moco nasal fue siempre negativo, pero en las muestras de los grupos 1 y 2 obtenidas en la necropsia, se aisló la cepa de desafío (19/20). En las muestras de moco nasal obtenidas antes del desafío los resultados de la PCR-Multiplex fueron negativos, después del desafío, se obtuvo un producto de amplificación de 150 pb característico de M. bovis patógeno, de cuatro animales del Grupo 1 al día 60, y de seis animales del mismo grupo al día 90. Con el ADN obtenido del cultivo bacteriológico de los grupos 1 y 2 se observó amplificación de M. bovis patógeno. Ninguno de los productos de amplificación correspondió a M. bovis-BCG, lo que confirma que la cepa vacunal no se disemina por sangre y tampoco se elimina por moco nasal. El empleo de la PCR-Multiplex en muestras biológicas como moco nasal, permitió distinguir a los animales vacunados con BCG de los infectados.