Optimización de un protocolo de extracción de ADN a partir de sangre bovina hemolizada y coagulada para la detección molecular de Anaplasma spp.

Autores/as

  • Tomas Humberto Landázuri Rafael Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus Cumbayá, Diego de Robles s/n, 170901. Quito, Ecuador. Pontificia Universidad Católica del Ecuador. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Quito, Ecuador.
  • Andrés Carrazco Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus Cumbayá, Diego de Robles s/n, 170901. Quito, Ecuador.
  • Renato León Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus Cumbayá, Diego de Robles s/n, 170901. Quito, Ecuador.
  • Lenin Vinueza Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias de la Salud, Escuela de Medicina Veterinaria. Quito, Ecuador. https://orcid.org/0000-0002-4587-8795
  • Veronica Barragan Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus Cumbayá, Diego de Robles s/n, 170901. Quito, Ecuador. https://orcid.org/0000-0002-2205-3010

DOI:

https://doi.org/10.22319/rmcp.v12i2.5635

Palabras clave:

Anaplasma, Anaplasmosis, Detección molecular, Extracción de ADN, Chelex® 100, Sangre

Resumen

La anaplasmosis es una enfermedad que puede afectar de manera significativa a la producción en el sector pecuario. Para la detección molecular por PCR de Anaplasma spp., se requiere de una extracción eficiente de ADN a partir de sangre completa, lo que a su vez depende de la calidad de la muestra de sangre. Fallas en los procedimientos de muestreo o conservación de las muestras pueden ocasionar hemolisis y coagulación de la sangre, lo que a su vez puede obstaculizar el diagnóstico.  El objetivo de esta investigación fue optimizar un protocolo casero de bajo costo que utiliza resina de Chelex® 100 y permite detectar de manera eficiente a Anaplasma spp. en 30 muestras de sangre bovina hemolizada y coagulada. La eficiencia del protocolo optimizado se comparó con dos kits comerciales de extracción de ADN mostrando una alta concordancia (Kappa de Cohen = 0.72) en la detección molecular de Anaplasma spp. por PCR. Se recomienda esta metodología para superar las limitaciones de investigación que pueden surgir al extraer ADN a partir de muestras de sangre complejas.

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Biografía del autor/a

Tomas Humberto Landázuri Rafael, Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus Cumbayá, Diego de Robles s/n, 170901. Quito, Ecuador. Pontificia Universidad Católica del Ecuador. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Quito, Ecuador.

Estudiante regular de Pontificia Universidad Católica del Ecuador

Estudiante no regular de Universidad San Francisco de Quito

 

Andrés Carrazco, Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus Cumbayá, Diego de Robles s/n, 170901. Quito, Ecuador.

Ex estudiante de la Universidad San Francisco de Quito. Realizó el trabajo mientras afiliado a la USFQ.

Actualmente se encuentra trabajando en el Instituto Nacional de  Investigación en Salud Pública

Renato León, Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus Cumbayá, Diego de Robles s/n, 170901. Quito, Ecuador.

Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales

Professor e Investigador

Veronica Barragan, Universidad San Francisco de Quito. Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales, Campus Cumbayá, Diego de Robles s/n, 170901. Quito, Ecuador.

Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales

Instituto de Microbiología

Profesor e investigador

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Publicado

15.09.2021

Cómo citar

Landázuri Rafael, T. H., Carrazco, A., León, R., Vinueza, L., & Barragan, V. (2021). Optimización de un protocolo de extracción de ADN a partir de sangre bovina hemolizada y coagulada para la detección molecular de Anaplasma spp. Revista Mexicana De Ciencias Pecuarias, 12(2), 653–664. https://doi.org/10.22319/rmcp.v12i2.5635
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