Identificación de las proteínas de 35 y 38 Kda específicas de Brucella ovis

Resumen

La técnica de inmunotransferencia se ha utilizado como prueba auxiliar para el diagnóstico de Brucella ovis, corroborando el diagnóstico con fijación de complemento (FC), inmunodifusión doble en agar (IDG) y el ensayo inmunoenzimático (ELISA). El extracto salino caliente (HS) de B. ovis, es el antígeno que más se ha utilizado en estas pruebas, sin embargo, se ha observado gran similitud entre las bandas proteicas de B. ovis y B. melitensis, existiendo con esto una reacción cruzada con sueros contra B. melitensis, lo que interfiere con el diagnóstico. Por ello, el objetivo fue identificar proteínas específicas de B. ovis, y evaluar el patrón de antigenicidad por inmunotransferencia. Se utilizaron cepas de B. ovis, B. melitensis, M. haemolytica, A. seminis y H. somnus. De las cepas de B. ovis Reo 198 y de B. melitensis 16M, se obtuvieron las fracciones celulares (membrana externa, interna y citosol). Se cuantificaron proteínas y se realizó la electroforesis PAGE-SDS de las fracciones celulares y de los extractos totales de todos los microorganismos. Las proteínas fueron transferidas a membranas de nitrocelulosa, y tratadas con suero hiperinmune contra B. ovis. Se identificaron tres bandas de reconocimiento, de 35, 38 y 81 kDa específicas de B. ovis, que no aparecieron en B. melitensis, ni en los demás microorganismos. Estas proteínas podrían ser utilizadas en el diagnóstico de la epididimitis por B. ovis, y debidamente estandarizada, presentar una sensibilidad y especificidad superior a inmunodifusión doble en agar o a fijación de complemento.